做荧光定量PCR时，它的计算公式是什么?

1. 做荧光定量PCR时，它的计算公式是什么?

Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。
n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。
起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

扩展资料
传统定量PCR方法简介：
1）内参照法：在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。
在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。
扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
参考资料来源：百度百科-荧光定量PCR

2. 做荧光定量PCR时，它的计算公式是什么?

Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。
每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，公式如下。
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图(单一峰图表明PCR扩增产物的单一性)
2.TaqMan探针法:
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时，Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

3. 做荧光定量PCR时，它的计算公式是什么?

Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)。
n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。
起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

扩展资料
传统定量PCR方法简介：
1）内参照法：在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。
在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。
扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
参考资料来源：百度百科-荧光定量PCR

4. 做荧光定量PCR时，它的计算公式是什么

△△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品) 
△Ct(试验样品) = Ct（试验样品,目的基因） — Ct（试验样品,内参基因） 
△Ct(基准样品) = Ct（基准样品,目的基因） — Ct（基准样品,内参基因）
2 －△△Ct =2 －（－1.2）= 2.30

5. 什么是实时荧光定量PCR，检测指标是什么？

实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。

检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。


原理：

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

6. 实时荧光定量PCR,4.25+04这个是什么意思

就是每毫升的血液中有8.95*10的4次方(就是8.95*10000)的病毒数。就病毒指数来看,不是太严重。【摘要】
实时荧光定量PCR,4.25+04这个是什么意思【提问】
就是每毫升的血液中有8.95*10的4次方(就是8.95*10000)的病毒数。就病毒指数来看,不是太严重。【回答】
是传染病毒吗【提问】
是传染病毒吗，这个是不是的【回答】
请问是乙肝病毒吗？【提问】
不是的【回答】
医生那这个是什么病呀【提问】
小三阳吗【提问】
实时荧光定量PCR2.04+07是乙肝病毒DNA量的表示方法【回答】
我刚才看错了非常不好意思【回答】
还请问一下这个是什么病呀【提问】
乙肝病毒【回答】
哦，你那下说不是的，以为是真的，这个病严重吗【提问】
乙型肝炎病毒感染，是在医学上常用的一个词语，简单的来说，乙型肝炎病毒的感染，就是乙肝病毒进入到人的身体里，乙肝病毒感染，进入到人的身体里之后，有几种可能的途径，如果你身体，是对乙肝病毒有抵抗力的，机体的免疫系统，就会把这个病毒清除掉，你可能会在不知不觉当中，就把这个病毒清除掉了，如果你是一个成年人，你对乙肝病毒的抵抗力，又不是很强，这时候乙肝病毒，进入到你的身体里之后，可能会引起你的肝脏的损伤，但是你的机体的抵抗力，是非常健全的，所以说，经过了一场急性的损伤之后，大部分人都能够从，损伤当中恢复过来，也就是表现为一个，急性的乙型肝炎的情况，在我们幼年或者是出生的时候，如果接触了乙肝病毒，这时候身体，对于乙肝病毒的抵抗力，是不健全的，有相当一部分人，在这个时间接触了乙肝病毒之后，也就是感染了乙肝病毒之后，会表现为一个慢性感染的情况。【回答】

7. 做荧光定量PCR时，△△Ct值是什么意思，它的计算公式是什么

△△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品) 
△Ct(试验样品) = Ct（试验样品,目的基因） — Ct（试验样品,内参基因） 
△Ct(基准样品) = Ct（基准样品,目的基因） — Ct（基准样品,内参基因）
2 －△△Ct =2 －（－1.2）= 2.30

8. 请问：做荧光定量PCR时，△△Ct值是什么意思，它的计算公式是什么？

△△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品) 
△Ct(试验样品) = Ct（试验样品，目的基因） — Ct（试验样品，内参基因） 
△Ct(基准样品) = Ct（基准样品，目的基因） — Ct（基准样品，内参基因）
2 －△△Ct =2 －（－1.2）= 2.30
*******************************
您好，答案已经给出，请您浏览一遍
有什么不懂的地方欢迎回复我！
如果满意请及时点击【采纳为满意答案】按钮
或者客户端的朋友在右上角评价点【满意】

您的采纳，
是我答题的动力
也同时给您带来知识和财富值
***************************************************