维生素c含量测定

1. 维生素c含量测定

VC具有抗坏血病的效应,所以又称抗坏血酸(Ascorbicacid).它是人体不可缺少的一种重要营养物
质,常存在于新鲜的蔬菜和水果中.由于抗坏血酸参与体内一系列代谢和反应,能促进胶原蛋白和粘多糖
的合成,增加微血管的致密性,降低其通透性及脆性,增加机体抵抗力.缺乏时,引起造血机能障碍、贫血、
微血管壁通透性增加,脆性增强和血管容易破裂出血,严重时肌肉、内脏出血死亡,这些症状在临床上通常
称为坏血病.因此抗坏血酸不仅是人体所必须的由外界提供的营养物质,同时也是维持正常生命过程所必
需的一类有机物.人正常每天最低需要量为75mg,长期缺乏抗坏血酸会导致某种营养不良症状及相应的
疾病,所以,VC对维持人体健康十分重要.对部分食品中的营养成分———抗坏血酸的含量做一些测定,为
指导人们合理膳食,正确补充营养素有一定意义.
目前测定抗坏血酸的方法有2, 6-二氯靛酚滴定法、2, 4-二硝基苯肼分光光度法[1]、荧光分光光度
法、近红外分光光度法[2]、电位滴定法[3-4]、钼蓝比色法[5]、褪色光度法[6]、高效液相色谱法[7]等.不同方
法各有其长处,但也有一定的局限性.如2, 6-二氯酚滴定法及2, 4-二硝基苯肼光度法操作复杂,测试条
件较为严格. 2, 4-二硝基苯肼光度法完成一次样品分析需数小时,不能快速测定[8].利用VC分子中的烯
二醇基将Fe3+定量还原成成F2+e与2, 2’-联吡啶(2, 2-bipyridine)进行显色反应.并利用2, 2’-bipy-
Fe2+-VC显色体系在本文研究的最佳测定条件下用分光光度法间接测定VC的含量,由于剩余Fe3+的也
能与2, 2’-联毗啶显色,可用NaF将其掩蔽.此法简便、快速,结果令人满意,为食品和药片中VC含量的
测定提供了方法.
1试验部分
1. 1主要仪器和试剂
722型光栅分光光度计(山东高密分析仪器厂);电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);
六孔数显水浴锅(金坛市环保仪器厂);捣碎机.
0·000 125 0mol/L维生素C标准溶液:准确称取维生素C(分析纯) 0·011 01 g,加入适量pH 3三氯
乙酸溶液溶解,定量转移到500mL的棕色容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液稀释至刻度,暗处放置.
Fe3+标准溶液: 0·001mol/L,称取硫酸铁铵0·24 g,用1mol/L,的硫酸溶解,用水稀释到500mL.
2, 2’-联吡啶: 0·004mol/L,称取固体物质用少量的无水乙醇溶解,并用水稀释到250mL.
1mol/L的NaF标准溶液.
1·2试验方法
用移液管移取10mLFe3+标准溶液和一定量的VC标准溶液于50mL比色管中.加入10mL pH 3三氯
乙酸溶液,然后加入一定量的2, 2’-联吡啶溶液和1mol/LNaF溶液1·00mL,用水稀释至50mL、摇匀.
室温条件下静置10min后置1 cm比色皿中,在分光光度计上以试剂空白为参比,于520 nm波长处测定其
吸光度.
2结果与讨论
2. 1测量波长的选择
按试验方法以试剂为空白,将显色后的溶液在400~600 nm区
间内绘制吸收曲线,如图1所示.结果表明最大吸收波长为520 nm,
实验选用520 nm为测定波长.
2. 2显色剂加入量
试验结果表明, 0·004 mol/L 2, 2’-联吡啶用量在8·0~10·0
mL范围内,吸光度达到最大且稳定.本法用量为9mL.
2. 3反应时间与温度的影响
分别考察了反应时间与反应温度对体系吸光度的影响,结果表
明,室温度时定容5~10min之内即可显色完全,且显色在100min
内相当稳定.本文选择在室温下反应10min.
2·4离于对试剂的选择
当CTMAB加入5mL时对2, 2’-bipy-Fe2+-VC形成络合物的吸光度和吸收波长无显著影响,而加
入三乙醇胺则可使显色体系的吸光度增大.
2. 5掩蔽剂及用量选择
在试验中发现,被抗坏血酸还原后剩余的Fe3+也可以与2, 2’-联吡啶生成有色配合物,并在光还原
作用下还原为Fe2+与2, 2’-联吡啶的配合物,因此需要用掩蔽剂来掩蔽剩余的Fe3+,本实验选用1mol/L
NaF溶液作为掩蔽剂,进一步研究表明, 0·25mL以上的1mol/LNaF溶液即能达到掩蔽作用.故本文选用
1mL的1mol/LNaF溶液作为掩蔽剂.
2. 6标准曲线制备
按试验方法对标准系列进行显色测定,结果表明:VC质量浓度在0·088~7·0mg/L范围内符合比尔
113第3期           刘宇奇,杨 睿,杨 泳:光度法测定药品和食物中的微量VC
定律;回归方程为:A=0·003 25+231 49·455 03C(mol/L),相关系数为0. 999 91;表观摩尔吸光系数ε=
2·40×104L·mol-1·cm-1.
2·7干扰离子的影响
当相对误差控制在±5%以内,对1·0mg/L的抗坏血酸进行测定时,下列倍数的物质不干扰:Na+,
Cl-,K+,NO3-,Zn2+(1 000倍),Mg2-, SO42+,Al3+(500倍), I′(100倍),Vitamin B1,Vitamin E(100倍),
常见离子中Ca2+(1 000倍),Ba2+对抗坏血酸的测定产生干扰,但在样品中Ba2+与Ca2+的含量一般比较
低.通常不需要分离处理,可以直接测定. 1mL的1mol/LNaF可掩蔽Fe3+,体系选择性较好.
2. 8样品分析
样品制备和测定分析
1)VC药片.分别将市售VC白片和VC黄片各一瓶倒入玻璃研钵中研细,充分混匀后,准确称取VC
白片0. 019 841 g和黄片0. 0138 6 g置于2个100mL的容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液浸取并定容.充分
摇动使其粉末分散约1~2min后,立即用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,精密移取过滤液1. 50mL于50mL
比色管中定容,按试验方法进行测定,结果如表1.
表1 药片中维生素C含量测定结果(n=6)
Tab. 1 The determ ination results of content of
vitam in C in m edical tablet(n=6)
样品本法测定值g/100 g加入量/μg回收率/% RSD /%
VC白片68·02 90 102·8 0·701
VC黄片57·89 89 103·7 0·325
表2 食物中维生素C含量测定结果(n=6)
Tab. 2 The determ ination results of content of
vitam in C in foods(n=6)
样品本法测定值加入量/μg回收率/% RSD /%
弥猴桃0·238 g/100g 0·200 98·2 0·541
黄瓜10·03mg/100g 0·200 104·9 1·41
鲜橙多58·50mg/100mL 0·200 96·3 1·08
2)食物样品.称取去皮猕猴桃
30·853 9 g和黄瓜25·425 8 g浸在一
定量的pH 3三氯乙酸溶液中,用捣碎
机捣碎混匀并过滤.取过滤后的猕猴
桃果汁置于500mL的容量瓶中、黄瓜
过滤液置于100mL的容量瓶中,并用
pH 3三氯乙酸溶液稀释至刻度.充分
摇动1~2min,立即用干燥滤纸滤去
初滤液,精密分别移取猕猴桃过滤液
1·00mL和黄瓜过滤液5·00mL于50
mL比色管中定容,按试验方法进行
测定,结果如表2.
3)饮料.移取鲜橙多10·00mL在
一定量的pH 3三氯乙酸溶液中,置于
100mL的容量瓶中,并用pH 3三氯乙酸溶液稀释至刻度.充分摇动1~2min,精密移取过滤液2·50mL
于50mL比色管中定容,按试验方法进行测定,结果如表2.
3结语
1)从表2中看出,水果中猕猴桃的维生素C含量较为丰富,在日常生活中应多食用这类水果,补充身
体所需营养素.
2)从表1和表2中方法的精密度、回收率以及标准曲线的线性关系来看,用分光光度法测定抗坏血酸
是可行的.但是由于抗坏血酸本身性质不稳定,容易降解,因此在进行样品处理时应注意尽快将样品捣碎
浸取在缓冲溶液中.
3)水果中含有的铁都是以有机物形式存在的,不与2, 2’-联吡啶直接络合,则不影响测定结果.水果
中的VC在空气中极易被氧化,样品处理时必须用保护剂防止VC被氧化.保护剂不能用草酸,因草酸具有
还原性,本法用三氯乙酸缓冲溶液作保护剂.
参考文献:
[1]闫树刚,韩涛.果蔬及其制品中维生素C测定方法评价[J].农学通报, 2002, 18(4): 110-112.
114昆明理工大学学报(理工版)              第33卷
[2]杨婷,逯家辉,张大海,等.菲林B近红外分光光度法测定维生素C[J].分析化学, 2005, 33(11): 1 593-1 595.
[3]陈秋丽,甘振威,张娅捷,等.电位滴定法测定深色蔬菜和水果中的维生素C[J].吉林大学学报:医学版, 2004, 30(5):
821-822.
[4]陈志慧.荔枝保鲜过程中维生素C的快速电位滴定[J].理化检验(化学分册), 2006, 42(8): 664-665.
[5]李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学, 2000, 21(8): 42-45.
[6]孙德坤,许月明,吴定.褪色光度法测定果蔬中VC的含量C[J].食品工业科技: 2003, 24(5): 93-95.
[7]胡志群,王惠聪,胡桂兵.高效液相色谱测定荔枝果肉中的糖、酸和维生素C[J].果树学报, 2005, 22(5): 582.
[8]奚长生.磷钼蓝分光光度法测定维生素C[J].光谱学与光谱分析, 2001, 21(5): 723-725.
(上接第103页)
该综合方程的R2更接近1;F值临界值为6·42,而该方程的F值为30·59;P值减小,表明该回归方程
具有更好的统计意义.方程说明ΔE(H-L),Q(C5)和EL对药物的活性有较大的影响.活性参数(pIC50)
的值越大,药物作用在受体上的活性越好.从方程可以看出ΔE(H-L)越小,Q(C5)更正(即负电荷越少)
药物的活性更强.因此可以看出ΔE(H-L)和Q(C5)可能是决定药物活性的主要因数.EL2对药物活性也
有一定影响,但系数较小,影响也较小.
3结论
通过对灯盏花苷Ⅰ及其衍生物前线分子轨道的分析和构效关系的计算,计算结果定量的表明,当灯盏
花苷Ⅰ及其衍生物作用于受体的时候,ΔE(H-L)和Q(C5)是决定药物活性的主要因数.文中所得到的表
示pIC50与量子化学参数间关系的相关方程式,为类似衍生物的生物活性的预测提供了一个简单可行的

2. 维生素C的含量测定

你这个题目应该有一个维c片的规格，算法是
百分含量=vft/w/规格平均片重*100%
  =21.89*0.0520/0.05*8.806/0.2125/1000*1.1080/10/规格*100%，就得出答案了

3. 食物中维生素C怎样提取和含量测定？

食物中的总维生素C包括还原型和脱氢型两种形式。食物陈旧，贮存日久以及经过烹调处理的食物，其中有相当一部分维生素C成为脱氢型，此种形态的维生素C仍有85%左右的维生素C活性，所以对这类食物常常测定总维生素C。测定时须将样品中的还原型维生素C氧化成脱氢型维生素C。因脱氢维生素C和二酮古洛糖酸都能与2，4-二硝基苯肼作用生成红色的脎，脎的生成量与总维生素量成正比。于是将脎溶于硫酸，再与同样处理的维生素C标准液比色，可求出样品中的总维生素C的含量。
生物帮上面有这方面的实验方法步骤，
生物问答
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4. 维生素c制剂中维生素C含量的测定

　　维生素C（又称抗坏血酸）普遍存在于水果和蔬菜
　　中，也是一种对人类而言至关重要的物质：人体缺乏维生素C
　　将导致坏血病，维生素C还能防止传染性疾病，甚至癌症。所
　　以，食品饮料、医药、医疗等行业都要测定食品、饮料、药
　　品以及血液中的维生素C的含量。

　　测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚
　　（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、
　　简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反
　　应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的
　　选择性，是一种理想的氧化剂。

　　传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定
　　终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手
　　工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不
　　同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪
　　解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终
　　点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利
　　多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方
　　便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定
　　的实验方法。

　　2.6一二氯酚靛酚滴定法测定还原型抗坏血酸是多年采用的经典方法。该法简便易行、快速，目前仍被广泛运用。但此方法尚存着一定均缺点，突出的一点是滴定终点难以确定。利用2.6一二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性物质溶液而当抗坏血酸尚未被全部被氧化时，滴下的2.6一二氮酚靛酚立即被还原成无色。而溶液中的坑坏血酸一旦被氧化，则滴入的2.6一二氮酚靛酚则立即使溶液呈现红色。所以，当溶液从无色转变成微红色时，即表示溶液中的抗坏血酸刚刚
　　被全部氧化，此时为滴定终点。此种方法对于无色或淡黄色、绿色样品液的滴定终点易确定，而对于山植、大枣、草葺、酸枣等紫色、粉红或褐色等色泽的朵蔬样品液的滴定终点就难以观察确定。为此，往往经稀释，添加活性炭、白陶土来进行脱色处理，添加维生素C的方法来解决。既使如此，仍难得到满意的结果，测定数据也很难准确。为克服以上缺点，近年来经反复多次的实验研究，采用2.6一二氯酚靛酚反滴定法测果蔬中还原抗坏血酸，终于摸索出比较合理的实
　　验条件，收到了比较满意的效果。

5. 怎样测定维生素C的含量？

测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚 （DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、 简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反 应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。 
    传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定 终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手 工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不 同的反应要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪 解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终 点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利 多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方 便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定 
的实验方法。

6. 维生素C的含量测定方法为（ ）。

【答案】B
【答案解析】本组题考查要点是"药物的含量测定方法"。铈量法可直接测定某些金属的低价化合物及有机还原性物质。同时铈量法还不易受制剂中淀粉、糖类的干扰，因此特别适合片剂、糖浆剂等制剂的测定。《中国药典》收载的硫酸亚铁片、葡萄糖酸亚铁及其制剂、富马酸亚铁及其制剂、硝苯地平等药物都是采用铈量法测定。《中国药典》采用酸碱滴定法测定阿司匹林含量；维生素C具有还原性，《中国药典》采用碘量法测定维生素C的含量。

7. 维生素c含量的测定实验

维生素c含量的测定实验如下：
1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，
以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。

本方法的最小检出限为0.022g/ml。
2．适用范围GB12392-90本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定
3．仪器3．1．实验室常用设备。3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。3．3．打碎机。
4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。
（2）0.15mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。
（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。
（4）50%乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。
（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。临用前配制。

8. 维生素C的结构与测定

——中山大学营养学教授、 博士生导师 蒋卓勤

维生素C是人体需求最大的维生素、作用最 为广泛的维生素之一，对人体健康至关重要。

维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生 素，容易从体内流失。人体不能自行制造维生 素C，因此必须每天从富含维C的食物中摄取来 满足全身需要。在所有的维生素中，维生素C是 人体每天需要量最多的维生素。维生素C在体内 参与细胞间质的合成和多种反应，如参与氧化 还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼 吸中起重要作用，并促进一些营养素的吸收利 用，对人体健康至关重要。

提高人体的免疫力

维C可增强中性粒细胞的趋化性和变形能动 力，提高杀菌能力；促进淋巴母细胞的生成， 提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭。此 外，维C参与免疫球蛋白的合成；促进干扰素的 产生，干扰病毒信使核糖核酸的转录，抑制病 毒的增生，从多方面提高人体的抗病能力。因 此，在感冒流行季节可以适当补充维生素C，防 治呼吸道感染、预防感冒。

参与胶原蛋白的合成

人体由细胞组成，细胞间的联系靠细胞间 质来连接，细胞间质的关键成分是胶原蛋白。 胶原蛋白占身体蛋白质的1/3，参与组成结缔组 织，构成身体的支架。维生素C在合成胶原蛋白 的过程中起到重要的作用。如维生素C缺乏，会 导致细胞连接障碍，微血管容易破裂，血液流 到邻近组织。这种情况发生在皮肤，则产生淤 血、紫癍；在体内发生则引起疼痛和关节涨痛 ；严重情况时，在胃、肠道、鼻、肾脏及骨膜 下面均可有出血现象，甚至死亡，故被称为坏 血病。包裹每一颗牙齿的牙龈软组织，主要成 分也是胶原蛋白，当缺乏维生素C时易产生牙龈 萎缩、出血。皮肤也会由于胶原蛋白减少而粗 糙并失去弹性（正因此，维C有美化皮肤的作用 ）。

抗氧化作用

机体氧化损伤产生的自由基可侵犯人的各 种细胞，侵犯DNA导致癌症；侵犯血管就会加 速动脉硬化；侵犯眼睛晶状体就会引起白内障 等。因此，抗氧化是一个重要的养生防病措施 。维C是强有力的抗氧化剂，可以保护其它抗氧 化剂，如维生素A、E免受氧化破坏；可抑制脂 质过氧化自由基生成，阻断脂质过氧化，防止 自由基对人体的伤害。

参与胆固醇的代谢

维C可促进胆固醇的羟化和排泄，防止胆固 醇在动脉内壁沉积，发挥预防动脉硬化的作用 。

促进铁、钙和叶酸的吸收

食物中的铁分为血红素铁和非血红素铁。 血红素铁是二价铁，吸收率较高。非血红素铁 是三价铁，需在体内转化成二价铁才可被人体 吸收。维C可将三价铁还原成二价铁，促进铁的 吸收。血红素铁在动物肉类中占40%，吸收率 可达20%~25%；而在植物性食物中的是非血红 素铁，吸收率较低，约1%～3%。我国居民以 植物性食物为主，因此多吃含维C丰富的食物对 铁的吸收很重要，也是防治缺铁性贫血的一个 好办法。

钙在消化道呈可溶状态是被吸收的基本条 件。维C在胃中可形成一种酸性介质，防止不溶 性钙络合物的生成及发生沉淀，促进钙的吸收 利用。

维C可将叶酸还原成有生物活性的四氢叶酸 ，利于叶酸的吸收利用，预防发生巨幼红细胞 性贫血。因此，服用铁剂、钙剂或叶酸补充剂 的同时，最好服用维生素C。

解毒

维C被誉为万能解毒剂，可促进肝脏肝糖原 的形成，而肝糖原在肝脏解毒中起着重要作用 ；有害重金属污染环境是目前存在的一个普遍 问题，而维生素C可直接参与重金属的解毒过程 ，可有效预防像铅、镉、汞等有害重金属对人 体的毒害作用。

防癌

维C的抗氧化作用可以抵御自由基对细胞的 伤害，防止细胞的变异；阻断亚硝酸盐和仲胺 形成强致癌物亚硝胺。此外，维C促进胶原蛋白 的合成，有助于防止癌细胞的扩散。

我国营养学会推荐每日维生素C的摄入量是 4~6岁60毫克，7~10岁80毫克，11~13岁90毫 克，14岁以上人群100毫克，孕妇和乳母130毫 克。新鲜的蔬菜和水果是维生素C的重要食物来 源，如大枣、猕猴桃、山楂、草莓、柑橘类等 水果，以及绝大多数的绿叶蔬菜。但由于维生 素C性质极不稳定（维C是最不稳定的一种维生 素，容易被氧化，遇空气、热、光、碱性物质 和氧化酶时极易被破坏）且会溶于水，我们在 清洗、加工或储存时，都会造成维生素C的大量 流失。因此在日常膳食以外补充适量的维生素C ，对满足机体需要、增强抗病能力是有意义的 。

作者简介

蒋卓勤：现任中山大学预防医学研究所副 所长、保健食品检测中心质量负责人，兼任中 华医学科技奖评审委员会委员、国家自然科学 基金项目评议人。